Hoe wordt GFP toegepast in farmaceutisch onderzoek?
Het GFP eiwit wordt voornamelijk gebruikt als receptorgen, oftewel als label voor expressie van onderzochte genen. Een gen van een te onderzoeken organisme wordt zo gemanipuleerd dat in regios waar het gen tot expressie komt, GFP mee geproduceerd word.
Hoe werkt een fluorescentie microscoop?
Bij de fluorescentiemicroscoop worden fluorescerende stoffen toegevoegd aan het te onderzoeken specimen. Deze hechten zich aan bepaalde delen van het weefsel – zoals eiwitten – en lichten op wanneer ze worden blootgesteld aan licht met een kortere golflengte.
Waar komt fluorescentie vandaan?
Het begrip fluorescentie is afkomstig van fluoriet: een mineraal dat bestaat uit het zout calciumfluoride (CaF2), een bekende fluorescerende stof.
What is green fluorescent protein (GFP)?
Green fluorescent protein (GFP) is a protein in the jellyfish Aequorea Victoria that exhibits green fluorescence when exposed to light. The protein has 238 amino acids, three of them (Numbers 65 to 67) form a structure that emits visible green fluorescent light.
What is GFP and how can I use it?
Fusion tagging: One of the most common uses, GFP can be fused to the N- or C-terminus of a protein, which allows the scientist to visualize when and where the gene is expressed. Click here to view Addgene’s collection of empty backbones for constructing fluorescent fusions.
What are the advantages of GFP over other fluorescent dyes?
GFP’s main advantage over conventional fluorescent dyes of the time was the fact that it was non-toxic and could be expressed in living cells, enabling the study of dynamic, physiological processes.
What is the fluorescence intensity of GFP?
In 1995, Roger Y. Tsien described an S65T point mutation that increased the fluorescence intensity and photostability of GFP. This also shifted its major excitation peak from 395 nm to 488 nm, effectively ameliorating the deficiencies found in the wildtype protein and facilitating its widespread use in research.