Inhoudsopgave
Waarom DNA-extractie?
DNA-extractie is een procedure waarmee DNA uit cellen geïsoleerd kan worden, zodat het vervolgens gebruikt kan worden in moleculair biologische experimenten of forensisch onderzoek.
Wat betekent DNA isolatie?
DNA isoleren uit cellen is de eerste stap in heel wat moleculair biologisch onderzoek. De genetische code lezen, genen opsporen, DNA van planten of bacteriën wijzigen,…: alles begint met een DNA-isolatie. Je kan DNA isoleren uit bacteriën, maar net zo goed uit een doodgewone kiwi.
Hoe werkt DNA isolatie?
De meest voorkomende technieken zijn het mechanisch openbreken van cellen en het chemisch openbreken van cellen. Bij het mechanisch openbreken van cellen worden de cellen blootgesteld aan druk of aan wrijving waardoor ze openbarsten.
Wat doet ethanol met DNA?
Ethanol is veel minder polair, het heeft een hydroxylgroep waardoor het oplosbaar is in water, maar de rest van deze verbinding heeft vooral een alkanisch karakter (apolair). De ionverbindingen zijn dus plots veel minder oplosbaar en de fosfaatgroepen van DNA kunnen het niet meer in oplossing houden.
Wat is zuiver DNA?
Dat DNA is wel vies, verontreinigd met dat van alle bacteriën die daar leven en van wat je hebt gegeten. Zuiver DNA wordt uit bloed gehaald, 5-10 ml is genoeg. Zonder het te beseffen laat je ook de hele dag door overal je DNA achter en gooit het weg.
Waarom wordt ethanol gebruikt bij DNA isolatie?
Ethanol en isopropanol zijn alcoholen. Alcoholen kunnen waterstofbruggen aangaan met watermoleculen. Wanneer de waterstofbruggen worden gevormd door isopropanol of ethanol vermindert dit het aantal watermoleculen die het DNA kunnen hydrateren (Wat doet ethanol in een DNA-extractie? z.d.).
Waar komt DNA voor?
Bij Eukaryoten (de “hogere” organismen zoals planten, dieren, schimmels en protisten) bevindt zich het belangrijkste DNA in de celkern (nucleus – vandaar ook nucleïnezuur). Daarnaast is er DNA in de mitochondriën (het mtDNA) en de eventueel aanwezige plastiden (het cpDNA).
Hoe kan je DNA in een gel zichtbaar maken?
Om de moleculen zichtbaar te maken, kan men gebruikmaken van zilverkleuring, coomassie brilliant blue, SYBR Green of ethidiumbromide in combinatie met uv-licht. Bij radioactieve moleculen kan men de visualisatie met een fotofilm doen.