Wat is de functie van DNA ligase?
DNA-ligase katalyseert de vorming van een fosfodi-esterbinding tussen nucleotiden aan één streng van een dubbelstrengs DNA-molecuul. DNA-ligase is in staat om een covalente koppeling te creëren tussen de 5′ fosfaatgroep van één keten en de aangrenzende 3′ -OH-groep van een andere.
Wat is een leidende streng?
De primer fungeert als het startpunt voor DNA-synthese. DNA-polymerase zich bindt aan de leidende streng en er vervolgens mee ‘loopt’ en nieuwe complementaire toevoegingen toevoegt nucleotide basen (A, C, G en T) naar de DNA-streng in de richting 5 ‘naar 3’. 7. Dit soort replicatie wordt continu genoemd.
Waarom hebben prokaryoten geen telomeren?
Telomeer betekent in het Grieks eindstuk. Een telomeer komt niet voor bij prokaryoten met een ringvormig chromosoom. Oude cellen hebben chromosomen met een korter telomeer dan jonge cellen. Bij iedere deling rafelt het uiteinde een stukje uit en uiteindelijk kan de cel niet meer delen en sterft.
Wat gebeurt er precies tijdens de verdubbeling van het DNA?
Replicatie is het verdubbelen van het DNA tijdens de S-fase van de celcyclus. In deze fase van de celcyclus verdubbelt de celkern zijn DNA. Een cel met 92 strengen DNA in zijn celkern kan elke dochter cel een setje van 46 strengen DNA meegeven. Vanaf het einde van de S-fase zitten er dus 92 strengen DNA in de celkern.
Welke streng wordt korter bij DNA-replicatie?
Telomeren. Iedere keer dat het DNA op de gefragmenteerde wijze wordt gedupliceerd zoals bij de lagging strand, wordt deze streng iets korter. Op een gegeven moment is er namelijk geen ruimte meer om nog een laatste primer te plaatsen die het uiteinde voorziet van polymerisatie. Deze verkorting treedt op bij de telomeer …
Can ligate RNA to dsDNA?
Can also ligate the 3′ end of RNA to 5′-pRNA when annealed to a DNA complement. Allows selective ligation of nicks and cohesive ends in dsDNA, not ligating blunt ends or single-base overhangs.
How do you use T4 DNA ligase?
For cohesive (sticky) ends, use 1 µl of T4 DNA Ligase in a 20 µl reaction for 10 minutes. For blunt ends, use 1 µl of T4 DNA Ligase in a 20 µl reaction for 2 hours or 1 µl high concentration T4 DNA Ligase for 10 minutes.
Do you offer bulk packaging for DNA ligases?
Bulk packaging may also be available and requested for large recurring orders. For details on NEB’s quality controls for DNA ligases, visit our Ligase Quality page.
Does salt-t4 DNA ligase join cohesive end termini at high concentrations?
Salt-T4 DNA Ligase will join cohesive end termini at salt concentrations as high as 300 mM without any loss in activity.